Наука » Медицина » Гистология
Ввиду того, что лишенные питания ткани организма очень быстро начинают претерпевать необратимые изменения (будь то смерть цело-го организма или искусственное удаление отдельных его частей), первым и обязательным условием микроскопической техники являются предупреждение и задержка посмертных изменений в тканях. Это достигается путем фиксации взятого для исследования материала.
Фиксация, как указывает сам термин, представляет со¬бой закрепление, сохранение в обрабатываемом кусочке органа того строения, которое он имел при жизни. В основе действия фиксаторов лежат физико-химические процессы и в первую очередь процесс коагуляции белков.
Фиксация, как указывает сам термин, представляет со¬бой закрепление, сохранение в обрабатываемом кусочке органа того строения, которое он имел при жизни. В основе действия фиксаторов лежат физико-химические процессы и в первую очередь процесс коагуляции белков.
1. В/в струйно 8-10 ЕД простого инсулина, а затем в/в капельно со скоростью б-10 ЕД в час. Для этого готовят р-р, содержащий 50 ЕД инсулина в 500 мл ИНХ. Перед началом инфузии 50 мл данного р-ра пропускают через инфузи-онную систему и удаляют, чем достигается полная абсорбция инсулина поверхностью трубок. Р-р инсулина вводят со скоростью 60-100 мл в час, т.е. 6-ЮЕДинсулинавчас.таккакприготовленныйр-рсодержит 1 ЕДинсулинав 10 мл. При скорости 20 капель в минуту вливается 6 ЕД инсулина в час, при скорости 34 капли в минуту - 10 ЕД инсулина в час. Если уровень глюкозы в крови не снижается через 2 часа, то дозу инсулина увеличивают до 12-16 ЕД в час.
После достижения гликемии 11 ммоль/л в/в введение инсулина прекращают и назначают инсулин п/к по 4-6 ЕД каждые 3-4 часа под контролем гликемии. Уровень гликемии поддерживают в пределах 8-10 ммоль/л.
2. Более простой, но несколько менее эффективный метод в/м инъекций инсулина - 20 ЕД, лучше в дельтовидную мышцу плеча, затем - каждый час в/м 6-8 ЕД инсулина. Если при в/м инсулина в течение 2 ч гликемия не снижается - в/в капельное введение инсулина. После достижения уровня 11 ммоль/л - инсулин п/к по 4-6 ЕД каждые 3-4 часа.
3. Усиленная регидратация организма: в течение 1-го часа в/в капельно 1,5 л ИНХ или р-р Рингера; в течение 2-го часа - 1 л; в течение 3-го и 4-го часов - 0,5 л; в дальнейшем по 0,25-0,3 л каждый час в течение 8 часов. Инфузионная терапия проводится под контролем диуреза, который должен быть не менее 40-50 мл/ч. После достижения уровня гликемии 11,1-14 ммоль/л целесообразно вводить 5% р-р глюкозы для угнетения кетоацидоза и профилактики гипогликемии.
4. Восстановление электролитного баланса.
4.1. Борьба с гипокалиемией: в/в капельно 2% р-р калияхлорид, скорость 25 кап/мин (75мл/ч) в течение 4-5 ч, а затем по 25 мл/ч(скорость 8-10 кап/ мин). 4.2. Борьба с гипофосфатемией: в/в капельно калия фосфат со скоростью 10 ммоль/ч. 4.3. Борьба с гипомагниемией: в/в введение капельно 5-10% магния сульфата по 6-8 мл в течение 3 ч под контролем АД.
5. Восстановление кислотно-основного состояния. Если РН крови ниже 7 - в/в 2,5% р-р натрия гидрокарбоната со скоростью 340 мл/ч, за сутки около 400-600 мл.
Наука » Медицина » Гистология
Приготовление раствора гематоксилина
Добавить 2 г гематоксилина в 100 мл 96 % спирта, к полученному раствору добавить дистиллированную воду в количестве 100 мл, калийных квасцов 3 г, ледяной уксусной кислоты 10 мл. Прибавлять эти вещества нужно в строгой последовательности. Калийные квасцы должны быть химически чистые. Для того, чтобы произошло полное окисление гематоксилина (то есть для того, чтобы образовался гематоксилин) приготовленный раствор должен не менее 15 дней находиться в тёмном месте при доступе воздуха (для этой цели банка с раствором должна быть закрыта бумажным колпаком или сложенной в 3-4 слоя марлей). О созревании раствора можно судить по его цвету: светло-красный становится тёмно-красным через 15 дней. Раствор необходимо время от времени взбалтывать – это ускорит его созревание. Раствор очень долго сохраняется в банках с притертой пробкой.
Добавить 2 г гематоксилина в 100 мл 96 % спирта, к полученному раствору добавить дистиллированную воду в количестве 100 мл, калийных квасцов 3 г, ледяной уксусной кислоты 10 мл. Прибавлять эти вещества нужно в строгой последовательности. Калийные квасцы должны быть химически чистые. Для того, чтобы произошло полное окисление гематоксилина (то есть для того, чтобы образовался гематоксилин) приготовленный раствор должен не менее 15 дней находиться в тёмном месте при доступе воздуха (для этой цели банка с раствором должна быть закрыта бумажным колпаком или сложенной в 3-4 слоя марлей). О созревании раствора можно судить по его цвету: светло-красный становится тёмно-красным через 15 дней. Раствор необходимо время от времени взбалтывать – это ускорит его созревание. Раствор очень долго сохраняется в банках с притертой пробкой.
Особенности строения и функционирования различных отделов дыхательной системы у детей во многом определяют структуру бронхолёгочных заболеваний, характер течения и исход. К ним относятся:
1. Податливость грудной клетки из-за мягкости рёбер обусловливает склонность к парадоксальному дыханию.
2. «Экспираторное» строение грудной клетки, меньшее развитие дыхательной мускулатуры и высокое стояние диафрагмы ограничивают возможность увеличивать дыхательный объём.
3. Узкие (до 1 мм) и короткие носовые ходы, хорошее развитие сосудов СО носа резко затрудняют сосание при рините, ухудшают механическое очищение и согревание воздуха при прохождении через них.
4. Хрящи гортани нежные и податливые, их слизистая оболочка богата кровеносными и лимфатическими сосудами, клетчатка рыхлая — в связи с этим высокая частота возникновения и тяжесть течения ларингитов, нередко со стенозом гортани.
5. Трахея короткая, воронкообразной формы, слизистая оболочка богато васкуляризирована, нежная — приводит к более частому вовлечению в процесс при ларингитах и бронхитах и самостоятельному развитию изолированных трахеитов.
1. Податливость грудной клетки из-за мягкости рёбер обусловливает склонность к парадоксальному дыханию.
2. «Экспираторное» строение грудной клетки, меньшее развитие дыхательной мускулатуры и высокое стояние диафрагмы ограничивают возможность увеличивать дыхательный объём.
3. Узкие (до 1 мм) и короткие носовые ходы, хорошее развитие сосудов СО носа резко затрудняют сосание при рините, ухудшают механическое очищение и согревание воздуха при прохождении через них.
4. Хрящи гортани нежные и податливые, их слизистая оболочка богата кровеносными и лимфатическими сосудами, клетчатка рыхлая — в связи с этим высокая частота возникновения и тяжесть течения ларингитов, нередко со стенозом гортани.
5. Трахея короткая, воронкообразной формы, слизистая оболочка богато васкуляризирована, нежная — приводит к более частому вовлечению в процесс при ларингитах и бронхитах и самостоятельному развитию изолированных трахеитов.
Наука » Медицина » Гистология
1. Сполоснутый срез (замораживающий микротом) в водопровод-ной воде перенести в чашку с раствором гематоксилина на несколько минут (10-15 мин.)
2. Хорошо сполоснуть срез в водопроводной воде.
3. Дифференцировать в солянокислом спирте (1-% соляной кисло-ты в 70-% спирте), при этом срез из тёмно-фиолетового, фиолетово-синего, чёрно-синего становится коричневато-фиолетовым или коричневато-красным (5-6 капель соляной кислоты на 100 мл 70-% спирта).
4. Сполоснуть срез большим количеством водопроводной воды не-сколько раз до посинения.
5. Перенести срез в слабый раствор нашатырного спирта – аммиака (в дистиллированную воду накапать 3 капли нашатырного спирта; в такой щелочной среде срезы становятся синими (10мин.)).
6. Хорошо сполоснуть срез в дистиллированной воде несколько раз (в течение 15 минут).
7. Окрасить срез эозином (3-5 мин.)
2. Хорошо сполоснуть срез в водопроводной воде.
3. Дифференцировать в солянокислом спирте (1-% соляной кисло-ты в 70-% спирте), при этом срез из тёмно-фиолетового, фиолетово-синего, чёрно-синего становится коричневато-фиолетовым или коричневато-красным (5-6 капель соляной кислоты на 100 мл 70-% спирта).
4. Сполоснуть срез большим количеством водопроводной воды не-сколько раз до посинения.
5. Перенести срез в слабый раствор нашатырного спирта – аммиака (в дистиллированную воду накапать 3 капли нашатырного спирта; в такой щелочной среде срезы становятся синими (10мин.)).
6. Хорошо сполоснуть срез в дистиллированной воде несколько раз (в течение 15 минут).
7. Окрасить срез эозином (3-5 мин.)
1. В/в 0,3-0,5 мл 0,1% р-ра адреналина в 10-20 мл ИНХ. При отсутсвии эффекта через 15 мин. в/в капельно 0,5 мл. 0,1% р-ра адреналина в 250 мл ИНХ или 0,3-0,5 мл 0,1% адреналина в подъязычную область. Можно в/в капельно изадрин 0,1 -0,5мкг/кг в минуту. 2. В/в струйно 200-400 мг гидрокортизона гемисукцината или фосфата или 120 мг преднизолона с последующим переходом на в/в капельное вливание той же дозы в 250 мл 5% р-ра глюкозы 40 кап/мин. При отсутствии эффекта - в/в струйно 90-120 мг преднизолона.
3. В/в 0,5-1 мл 0,1% атропина сульфата а 10 мл ИНХ. 4. В/в медленно (3-5 мин) 10 мл 2,4% эуфиллина в 10-20 мл ИНХ. 5. Антигистаминные средства (супрастин, тавегил, димедрол) в/в по 2-3 мл в 10 мл ИКХ. 6. При отсутствии эффекта от перечисленных мероприятий фторотановый наркоз и при отсутствии эффекта от него ИВЛ. 7. Прямой массаж легких ручным способом (вдох осуществляется мешком наркозного аппарата, выдох - сдавленном грудной клетки руками) 8. В/в 200-300 мл 4% гидрокарбонат натрия. 9. П/к гепарин 20000-30000 ЕД/сут (распределив на 4 инъекции). 10. Для борьбы с отеком мозга в/в 80-160 мглазикса, 20-Ю мл 40% глюкозы.
3. В/в 0,5-1 мл 0,1% атропина сульфата а 10 мл ИНХ. 4. В/в медленно (3-5 мин) 10 мл 2,4% эуфиллина в 10-20 мл ИНХ. 5. Антигистаминные средства (супрастин, тавегил, димедрол) в/в по 2-3 мл в 10 мл ИКХ. 6. При отсутствии эффекта от перечисленных мероприятий фторотановый наркоз и при отсутствии эффекта от него ИВЛ. 7. Прямой массаж легких ручным способом (вдох осуществляется мешком наркозного аппарата, выдох - сдавленном грудной клетки руками) 8. В/в 200-300 мл 4% гидрокарбонат натрия. 9. П/к гепарин 20000-30000 ЕД/сут (распределив на 4 инъекции). 10. Для борьбы с отеком мозга в/в 80-160 мглазикса, 20-Ю мл 40% глюкозы.
Наука » Медицина » Гистология
Современная гистология располагает большим арсеналом средств для изучения биологических структур на всех уровнях их организации – клеточном, тканевом, органном. Основными объектами исследования являются гистологические препараты или их фотографии, классическим методом – микроскопирование.
Световая микроскопия наиболее распространенный способ изучения гистологических структур. Современные биологические микроскопы дают максимальное (до 2500 раз) увеличение (произведение увеличения объектива на увеличение окуляра).
Световая микроскопия наиболее распространенный способ изучения гистологических структур. Современные биологические микроскопы дают максимальное (до 2500 раз) увеличение (произведение увеличения объектива на увеличение окуляра).
Ориентировочная схема неотложной терапии больных:
1 стадия - стадия резиствипюсти к симпатомиметнкам.
1. Отмена адреностимуляторов (симпатомиметиков). 2. Глюкокортикоид-ная терапия: в/в струйно, капельно, непрерывно или через каждые Зч, суточная доза гидрокортизона • до 1500 мг, предниэолона • до 300-400 мг. 3. В/в струй-i но или капельно эуффилин до 1,5-2 г в сутки. 4. Инфузионная терапия : ИНХ, 5% р-р глюкозы, р-р Рингера -до 2-2,5 л/сут. 5. В/в капельно 4% гидрокарбоната натрия 200 мл . 6. В/в 10% р-р йодистого натрия до 30-60 мл/сут или 3% р-ра его внутрь. 7. Непрерывная инсуффляция кислородно-воздушной смесью (30-40%). 8. Сердечные гликозиды - по показаниям и после тщательной | оценки целесообразности. 9. В/в 20-40 мг лаэикса. 10, Кровопускание: при • сочетании повышенного ЦВД (до 150 мм.водн.ст. и выше) с гемоконцентрацией (гематокрит 50% и более). 11. В/в 0,25% р-р дроперидола 1-2 мл - при | наличии возбуждения больных. 12. Фторотановый наркозе целью бронходилатации. 13. Реополиглюкин 400-600 мл/сут., гепарин 25000-30000 ЕД/сут. 14. При недостаточной эффективности вышеуказанной терапии • проведение лечебной бронхоскопии. 15. Применение антибиотиков (исключая пенициллин и его аналоги) с учетом их переносимости в прошлом - если статус спровоцирован инфекцией.
По механизму развития все анемии делятся на пять больших групп.
1. Постгеморрагические анемии: острые и хронические.
2. Анемии вследствие недостаточности эритропоэза: наследственные, врождённые и приобретённые (идиопатические, аутоиммунные, транзиторные апластические анемии).
3. Дефицитные анемии (дефицит гемопоэтических факторов): железодефицитные; белководефицитные; витаминодефицитные (В 12, фолиевая кислота, С, Е и др.); дефицит микроэлементов (медь, цинк, магний); смешанные.
4. Гемолитические анемии (Г А ) : неиммунные ГА — врождённые и наследственные (мембранопатии: микросфероцитоз, стоматоцитоз, эллиптоцитоз; ферментопатии: дефицит глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и др.; гемоглобинопатии: серповидноклеточная ГА, талассемии) и приобретённые (Е-витаминодефицитная анемия новорождённых; токсические; болезнь Маркиафавы—Миккели; ДВС-синдром; механические повреждения эритроцитов), а также иммунные ГА — изоиммунные (гемолитическая болезнь новорождённых, посттрансфузионная, посталлотрансплантационная); трансиммунные (передача антител от матери с аутоиммунной ГА; гетероиммунные (медикаментозные, бактериальные, вирусные и др.) и аутоиммунные ГА.
5. Анемии смешанного генеза: при острой инфекции, сепсисе; при ожогах; при опухолях и лейкозах и при эндокринопатиях.
Анемии в зависимости от уровня гемоглобина и/или эритроцитов делят на 3 степени тяжести: I (лёгкой степени тяжести) — гемоглобин от 120 г/л до 90 г/л и эритроциты 3— 3 , 5 х Ю 12/л; I I (средней степени тяжести) — гемоглобин 90— 70 г/л, эритроциты 3,0—2 ,5 х 1 0 12/л; I I I (тяжёлой степени) — гемоглобин менее 70 г/л, эритроциты менее 2,5х 1012/л.
1. Постгеморрагические анемии: острые и хронические.
2. Анемии вследствие недостаточности эритропоэза: наследственные, врождённые и приобретённые (идиопатические, аутоиммунные, транзиторные апластические анемии).
3. Дефицитные анемии (дефицит гемопоэтических факторов): железодефицитные; белководефицитные; витаминодефицитные (В 12, фолиевая кислота, С, Е и др.); дефицит микроэлементов (медь, цинк, магний); смешанные.
4. Гемолитические анемии (Г А ) : неиммунные ГА — врождённые и наследственные (мембранопатии: микросфероцитоз, стоматоцитоз, эллиптоцитоз; ферментопатии: дефицит глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и др.; гемоглобинопатии: серповидноклеточная ГА, талассемии) и приобретённые (Е-витаминодефицитная анемия новорождённых; токсические; болезнь Маркиафавы—Миккели; ДВС-синдром; механические повреждения эритроцитов), а также иммунные ГА — изоиммунные (гемолитическая болезнь новорождённых, посттрансфузионная, посталлотрансплантационная); трансиммунные (передача антител от матери с аутоиммунной ГА; гетероиммунные (медикаментозные, бактериальные, вирусные и др.) и аутоиммунные ГА.
5. Анемии смешанного генеза: при острой инфекции, сепсисе; при ожогах; при опухолях и лейкозах и при эндокринопатиях.
Анемии в зависимости от уровня гемоглобина и/или эритроцитов делят на 3 степени тяжести: I (лёгкой степени тяжести) — гемоглобин от 120 г/л до 90 г/л и эритроциты 3— 3 , 5 х Ю 12/л; I I (средней степени тяжести) — гемоглобин 90— 70 г/л, эритроциты 3,0—2 ,5 х 1 0 12/л; I I I (тяжёлой степени) — гемоглобин менее 70 г/л, эритроциты менее 2,5х 1012/л.
Наука » Медицина » Гистология
Наклеивают парафиновые срезы на чистые обезжиренные предметные стекла, смазанные белком с глицерином. Для приготовления последнего свежий яичный белок взбивают шпателем и фильтруют через смоченный дистиллированной водой бумажный фильтр. К профильтрованному белку добавляют равный объем глицерина, смешивают и кладут для предупреждения загнивания 2-3 кусочка тимола величиной с зернышко пшеницы. В закрытой склянке белок с глицерином хранится длительное время. Маленькую капельку белка с глицерином наносят на предметное стекло и пальцем размазывают тонким слоем по стеклу. Если срезы были помещены в чашку с дистиллированной водой, белок на стекле коагулируют, подержав стекло над спиртовкой белком вверх. Затем расправленный срез при помощи кисточки вылавливают из воды и переносят на стекло. Осторожно наклоняя предметное стекло, дают воде стечь и затем на 12-24 ч стекло переносят в термостат с температурой 37°С.
Раннее искусственное вскармливание с введением чужеродного белка (коровьего) может привести к развитию пищевой аллергии у детей, особенно относящихся к группе риска по аллергическим заболеваниям.
К аллергическим причинам синдрома мальабсорбции относят аллергический энтероколит и энтеропатию.
Этиология. Коровье молоко — один из самых ранних ал лергенов, значимых для ребёнка на первом году жизни. Оно содержит более 20 белков-антигенов, наиболее аллергенным является (3-лактоглобулин.
Патогенез. При пищевой аллергии наблюдаются в основном три типа истинных аллергических реакций: немедленные аллергические реакции с участием реагинов, иммунокомплексные и замедленные Т-клеточные.
Пищевая аллергия протекает преимущественно по типу немедленных аллергических реакций с участием реагинов, входящих в состав IgE и IgG4, которые не несут функции, присущей IgA ; в просвете кишечника они деградируют под влиянием ферментов и, связываясь с тучными клетками в слизистой оболочке, вызывают их сенсибилизацию. Эти тучные клетки за счёт антител класса IgE и некоторых субклассов IgG взаимодействуют с соответствующими аллергенами пищи, повторно проникающими в слизистую кишечника и выделяют медиаторы аллергической реакции. В механизме развития пищевой аллергии важную роль играют и аллергические реакции иммунокомплексного и замедленного типов.
К аллергическим причинам синдрома мальабсорбции относят аллергический энтероколит и энтеропатию.
Этиология. Коровье молоко — один из самых ранних ал лергенов, значимых для ребёнка на первом году жизни. Оно содержит более 20 белков-антигенов, наиболее аллергенным является (3-лактоглобулин.
Патогенез. При пищевой аллергии наблюдаются в основном три типа истинных аллергических реакций: немедленные аллергические реакции с участием реагинов, иммунокомплексные и замедленные Т-клеточные.
Пищевая аллергия протекает преимущественно по типу немедленных аллергических реакций с участием реагинов, входящих в состав IgE и IgG4, которые не несут функции, присущей IgA ; в просвете кишечника они деградируют под влиянием ферментов и, связываясь с тучными клетками в слизистой оболочке, вызывают их сенсибилизацию. Эти тучные клетки за счёт антител класса IgE и некоторых субклассов IgG взаимодействуют с соответствующими аллергенами пищи, повторно проникающими в слизистую кишечника и выделяют медиаторы аллергической реакции. В механизме развития пищевой аллергии важную роль играют и аллергические реакции иммунокомплексного и замедленного типов.
Наука » Медицина » Гистология
Блок фиксируют в объектодержателе так, чтобы длинная ось блока располагалась вдоль длинной оси микротома, а поверхность блока горизонтальной. Очень важна правильная установка ножа. Оптимальным углом наклона ножа считается такой, когда плоскость фасетки совпадает с плоскостью среза. На практике угол наклона ножа обычно несколько больше оптимального. Если угол наклона ножа слишком велик, материал будет крошиться, если слишком мал, нож будет 1-2 раза проскальзывать над блоком, а потом срезать толстый срез.
Парафиновые блоки режут прямым ножом, целлоидиновые – плосковогнутым. При резке парафиновых блоков нож устанавливают перпендикулярно оси микротома или слегка под углом. И последнем случае нельзя получить серийных срезов, но зато очень плотные и трудно режущиеся объекты режутся легче. При резке целлоидиновых срезов нож устанавливают под углом.
Когда нож установлен, к нему осторожно подводят блокодержатель с блоком и одновременно придвигают нож к блоку. Подачу объектодержателя осуществляют с помощью кремальеры, расположенной в основании объектодержателя, либо рукой, толкая санки объектодержателя вдоль наклонных рельсов. Когда блок и нож сближены, проверяют горизонтальность верхней поверхности блока, которая не должна доходить до лезвия ножа на 0,5-1 мм. После этого устанавливают микрометрическую шкалу на получение толстых срезов (30 мкм) и движением салазок ножа начинают подавать блок вверх до тех пор, пока не начинают получаться первые полные срезы, затем микрометрическую шкалу следует установить на необходимую толщину срезов. Парафиновые срезы диаметром 7-10 мкм.
При очень хорошо залитом материале и хорошо наточенном ноже можно получить срезы толщиной 3-5 мкм. Толщина целлоидиновых срезов обычно составляет 12-15 мкм.
Парафиновые блоки режут прямым ножом, целлоидиновые – плосковогнутым. При резке парафиновых блоков нож устанавливают перпендикулярно оси микротома или слегка под углом. И последнем случае нельзя получить серийных срезов, но зато очень плотные и трудно режущиеся объекты режутся легче. При резке целлоидиновых срезов нож устанавливают под углом.
Когда нож установлен, к нему осторожно подводят блокодержатель с блоком и одновременно придвигают нож к блоку. Подачу объектодержателя осуществляют с помощью кремальеры, расположенной в основании объектодержателя, либо рукой, толкая санки объектодержателя вдоль наклонных рельсов. Когда блок и нож сближены, проверяют горизонтальность верхней поверхности блока, которая не должна доходить до лезвия ножа на 0,5-1 мм. После этого устанавливают микрометрическую шкалу на получение толстых срезов (30 мкм) и движением салазок ножа начинают подавать блок вверх до тех пор, пока не начинают получаться первые полные срезы, затем микрометрическую шкалу следует установить на необходимую толщину срезов. Парафиновые срезы диаметром 7-10 мкм.
При очень хорошо залитом материале и хорошо наточенном ноже можно получить срезы толщиной 3-5 мкм. Толщина целлоидиновых срезов обычно составляет 12-15 мкм.