1. Сполоснутый срез (замораживающий микротом) в водопровод-ной воде перенести в чашку с раствором гематоксилина на несколько минут (10-15 мин.)
2. Хорошо сполоснуть срез в водопроводной воде.
3. Дифференцировать в солянокислом спирте (1-% соляной кисло-ты в 70-% спирте), при этом срез из тёмно-фиолетового, фиолетово-синего, чёрно-синего становится коричневато-фиолетовым или коричневато-красным (5-6 капель соляной кислоты на 100 мл 70-% спирта).
4. Сполоснуть срез большим количеством водопроводной воды не-сколько раз до посинения.
5. Перенести срез в слабый раствор нашатырного спирта – аммиака (в дистиллированную воду накапать 3 капли нашатырного спирта; в такой щелочной среде срезы становятся синими (10мин.)).
6. Хорошо сполоснуть срез в дистиллированной воде несколько раз (в течение 15 минут).
7. Окрасить срез эозином (3-5 мин.)
8. Сполоснуть срез дистиллированной водой, несколько раз меняя воду.
9. Перенести срез в 70-% - 96-% спирт, но не держать его в спирте больше 1-2 минут.
10. Просветлить срез карбол-ксилолом (несколько секунд).
11. Сполоснуть ксилолом.
Во время работы с карбол-ксилолом и ксилолом быть предельно аккуратными. Нельзя разливать, оставлять открытым ёмкость с этими веществами, так как они являются потенциальными канцерогенами.
12. Заключить в бальзам (на срез наносится капля бальзама, после наложения покровного стекла, остатки бальзама удаляются чистой тряпочкой, продолжительность сушки окрашенного среза – 2-3 суток).