Наука » Медицина » Гистология
Научиться готовить микропрепарат – митоз корешка лука , не сложно.
Наиболее доступным объектом для демонстрации митоза в учебном процессе является репчатый лук Alium сера, который имеет в соматических клетках 8 пар хромосом .
Для приготовления препаратов можно использовать корешки либо проросшей луковицы, либо семян.
Для проращивания луковицы берут узкий стеклянный стаканчик, наполняют теплой водой и сверху помещают луковицу так, чтобы основание ее касалось поверхности воды. Когда образуются корни и длина их достигнет 2-3 см., воду меняют на теплую и спустя полчаса фиксируют корни.
Наиболее доступным объектом для демонстрации митоза в учебном процессе является репчатый лук Alium сера, который имеет в соматических клетках 8 пар хромосом .
Для приготовления препаратов можно использовать корешки либо проросшей луковицы, либо семян.
Для проращивания луковицы берут узкий стеклянный стаканчик, наполняют теплой водой и сверху помещают луковицу так, чтобы основание ее касалось поверхности воды. Когда образуются корни и длина их достигнет 2-3 см., воду меняют на теплую и спустя полчаса фиксируют корни.
Наука » Медицина » Гистология
Основной раствор кармина. Растворить в 60 мл дистиллированной воды 2 г кармина, 1 г углекислого калия и 5 г хлористого калия. Полученный раствор кипятить в течение 5 минут (не допуская бурного кипения), охладить и отфильтровать. Затем добавить к фильтрату 20 мл 28% раствора аммиака. Хранящийся в холодильнике при 0-4° раствор годен в течение 3 месяцев.
Раствор кармина для окрашивания. Слить 8 мл основного раствора, 12,5 мл аммиака (удельный вес 0,880) и 24 мл метанола (раствор годен 1-2 недели).
Раствор Беста для дифференцировки. К 8 мл абсолютного спирта добавить 4 мл метанола и 10 мл дистиллированной воды.
Метод окрашивания (парафиновые срезы).
1. Довести срезы до абсолютного Спирта.
2. Поместить в 1 % раствор целлоидина на 2-5 минут.
3. Высушить на воздухе.
4. Довести через спирты до воды.
5. Окрасить гематоксилином Эрлиха 5 минут.
Кома при отравлении этиловым спиртом.
1. Промывание желудка через зонд водой комнатной температуры, при глубокой коме необходима предварительная интубация трахеи.
2. Восстановление проходимости дыхательных путей введением воздуховода и отсасыванием слизи, слюны, рвотных масс; при патологических ритмах дыхания • ИВЛ через интубационную или трахеотомическую трубку.
3. В/в 500-800 мл 4% гидрокарбоната натрия, 1000-1500 мл 5% р-ра и 40-50 мл 40% глюкозы с инсулином (1 ЕД инсулина на 3-4 г глюкозы), 100 мг тиамина. 4. П/к 1-2 мл 10% кофеина, 2-3 мл кордиамина; а при выраженной артериальной гипотонии - 1 мл 5% эфедрина; 1 мл гутрона оксигенотерапия; профилактика ателектазов и пневмоний.
1. Промывание желудка через зонд водой комнатной температуры, при глубокой коме необходима предварительная интубация трахеи.
2. Восстановление проходимости дыхательных путей введением воздуховода и отсасыванием слизи, слюны, рвотных масс; при патологических ритмах дыхания • ИВЛ через интубационную или трахеотомическую трубку.
3. В/в 500-800 мл 4% гидрокарбоната натрия, 1000-1500 мл 5% р-ра и 40-50 мл 40% глюкозы с инсулином (1 ЕД инсулина на 3-4 г глюкозы), 100 мг тиамина. 4. П/к 1-2 мл 10% кофеина, 2-3 мл кордиамина; а при выраженной артериальной гипотонии - 1 мл 5% эфедрина; 1 мл гутрона оксигенотерапия; профилактика ателектазов и пневмоний.
Наука » Медицина » Гистология
Для гистохимического изучения активности и гистотопографии ферментов в тканях общераспространенные методы заливки материала в парафин или целлоидин часто оказываются совершенно непригодными. Высокая температура, необходимая для заливки в парафин, вызывает сильное уплотнение материала и, кроме того, инактивацию многих ферментов. Длительное пропитывание объекта целлоидином также обусловливает инактивацию ферментов и значительное вымывание их из исследуемого материала. Во избежание этих недостатков в гистохимии ферментов в последнее время используют заливку тканей в поливакс или полиэтиленгликоль.
1. Интубация трахеи.
2. Промывание желудка через зонд водой комнатной температуры, затем в желудок вводят 100-150 мл 33% сульфата магния, 50 г активированного угля, чтобы уменьшить всасывание и ускорить процесс выведения токсического агента из кишечника.
3. В/в 500-1500 мл 4% гидрокарбоната натрия, 1000-1500 мл 5% глюкозы и 1000-2000 мл ИНХ;
к каждому литру введенной жидкости - 1-2 г хлорида калия.
4. В/в 60-80 мг (6-8 мл 1%) лазикса, дважды, с интервалом в 1-2 ч или при сохраненной функции почек -3 ч.
Первые 2 ч вводят 1500-2000 мл различных р-ров, а в конце второго часа - в/в (в течение 20-30 мин.) свежеприготовленный 30% р-р мочевины или (в течение 1-2 ч) 10-20% р-р маннитола.
2. Промывание желудка через зонд водой комнатной температуры, затем в желудок вводят 100-150 мл 33% сульфата магния, 50 г активированного угля, чтобы уменьшить всасывание и ускорить процесс выведения токсического агента из кишечника.
3. В/в 500-1500 мл 4% гидрокарбоната натрия, 1000-1500 мл 5% глюкозы и 1000-2000 мл ИНХ;
к каждому литру введенной жидкости - 1-2 г хлорида калия.
4. В/в 60-80 мг (6-8 мл 1%) лазикса, дважды, с интервалом в 1-2 ч или при сохраненной функции почек -3 ч.
Первые 2 ч вводят 1500-2000 мл различных р-ров, а в конце второго часа - в/в (в течение 20-30 мин.) свежеприготовленный 30% р-р мочевины или (в течение 1-2 ч) 10-20% р-р маннитола.
Наука » Медицина » Гистология
Этот метод сочетает в себе преимущества парафиновой и целлоидиновой заливок. Применять его рекомендуется при обработке:
1) нежных объектов, которые легко сжимаются при парафиновой заливке (мезенхимная ткань, органы кроветворений и др.);
2) органов, которые расслаиваются при резке в парафиновом блоке (трахея, кожа и др.).
Метод. Промывка и обезвоживание стандартные. Из безводного спирта материал помещают в смесь из равных частей спирта с эфиром (4-20 часов), а затем в 2% раствор целлоидина. После полного пропитывания (24-48 часов) объект переносят в чистый хлороформ, где он находится до тех пор, пока не погрузится под его поверхность (30 ми-нут-1 час).
1) нежных объектов, которые легко сжимаются при парафиновой заливке (мезенхимная ткань, органы кроветворений и др.);
2) органов, которые расслаиваются при резке в парафиновом блоке (трахея, кожа и др.).
Метод. Промывка и обезвоживание стандартные. Из безводного спирта материал помещают в смесь из равных частей спирта с эфиром (4-20 часов), а затем в 2% раствор целлоидина. После полного пропитывания (24-48 часов) объект переносят в чистый хлороформ, где он находится до тех пор, пока не погрузится под его поверхность (30 ми-нут-1 час).
1. В/в 30-40 мл 10% натрия хлорида,а затем (через туже иглу или катетер) капельно 1000-1500мл 5% глюкозы.
При выраженной гипокалиемии на каждый литр вливаемой жидкости добавляют 1-2 г хлорида калия;
при гипонатриемии повторно вводят 15-20мл 10% натрия хлорида.
Для коррекции метаболического ацидоза применяют 4% гидрокарбонат натрия (до 400-800 мл).
2. Признаки сердечно-сосудистой недостаточности исчезают, как правило, в результате быстрой и тщательной коррекции водного и электролитного баланса. При сохраняющейся артериальной гипотонии - 2-3 мл кордиамина
или 1-2 мл 0,25% гауремиэина п/к или 1 мл гутрона, иногда переливание 300-500 мл изогрупной крови.
Наука » Медицина » Гистология
За последние годы в лабораторной практике находит применение способ одновременной заливки кусочков от нескольких сравниваемых органов в единый блок. Для этого подлежащие совместной заливке объекты проводят по спиртовой батарее одновременно и на том этапе, когда необходимо придать кусочкам окончательную форму, обрезают их края так, чтобы в нужной комбинации они могли тесно прилегать друг к другу и в то же время имели бы различную форму, позволяющую определить принадлежность каждого отдельного объекта ). После этого кусочки проводят вместе через промежуточные среды, парафины для пропитывания и укладывают в формочку для заливки в определенном порядке, стараясь сблизить края в процессе заливки.
Схему расположения кусочков и их обозначение сразу же заносят в протокольную тетрадь. Подобные комбинированные блоки можно составлять и из уже залитых отдельно кусочков, придавим в твердом состоянии необходимую форму и поместив затем в горячий парафин, находящийся в термостате.
Схему расположения кусочков и их обозначение сразу же заносят в протокольную тетрадь. Подобные комбинированные блоки можно составлять и из уже залитых отдельно кусочков, придавим в твердом состоянии необходимую форму и поместив затем в горячий парафин, находящийся в термостате.
Наука » Медицина » Гистология
Жидкость Карнуа. Служит хорошим фиксатором, как для гистологических исследований (ядра), так и для многих гистохимических методик (нуклеиновые кислоты, белки, полисахариды). Недостатком является легкое сморщивание цитоплазмы и соединительной ткани.
Состав и метод применения:
абсолютный этиловый спирт 60 мл
(при отсутствии можно заменить 96° спиртом)
хлороформ 30 мл
ледяная уксусная кислота 10 мл
Состав и метод применения:
абсолютный этиловый спирт 60 мл
(при отсутствии можно заменить 96° спиртом)
хлороформ 30 мл
ледяная уксусная кислота 10 мл
Наука » Медицина » Гистология
Жидкость Мюллера. В настоящее время применение ее в чистом виде ограничено. Однако она служит исходным раствором для приготовления таких распространенных фиксаторов, как жидкость Ценкера, Орта, Максимова и др. Состав:
* двухромовокислый калий - 2,5 г
* сернокислый натрий - 1 г
* дистиллированная вода - 100 мл
Для лучшего растворения бихромата калия рекомендуется подогревать воду.
Жидкость Ценкера (сулемовая смесь). Один из лучших фиксаторов для приготовления обзорных препаратов и препаратов для ряда тонких гистологических исследований. Обеспечивает хорошую окрашиваемость тканей. Состав и способ употребления:
* жидкость Мюллера - 100 мл
* сулема (НgСL2) - 5 г
* ледяная уксусная кислота - 5 мл
* двухромовокислый калий - 2,5 г
* сернокислый натрий - 1 г
* дистиллированная вода - 100 мл
Для лучшего растворения бихромата калия рекомендуется подогревать воду.
Жидкость Ценкера (сулемовая смесь). Один из лучших фиксаторов для приготовления обзорных препаратов и препаратов для ряда тонких гистологических исследований. Обеспечивает хорошую окрашиваемость тканей. Состав и способ употребления:
* жидкость Мюллера - 100 мл
* сулема (НgСL2) - 5 г
* ледяная уксусная кислота - 5 мл
Наука » Медицина » Гистология
Следует помнить, что излишнее пребывание объекта в фиксирующих жидкостях отрицательно сказывается на качестве получаемых препаратов, ибо ткани становятся хрупкими, ухудшается их окрашиваемость, наступает сжатие или набухание и т. д. Лишь некоторые фиксаторы пригодны для длительного хранения материала (10% формалин, жид¬кость Буэна).
В большинстве случаев фиксация производится при комнатной температуре. Однако для некоторых специальных исследований (особенно гистохимических и электронномикроскопических) применяют фиксацию охлажденными жид¬костями при температуре +4,0° и ниже.
В большинстве случаев фиксация производится при комнатной температуре. Однако для некоторых специальных исследований (особенно гистохимических и электронномикроскопических) применяют фиксацию охлажденными жид¬костями при температуре +4,0° и ниже.
Наука » Медицина » Гистология
Для того чтобы успешно осуществить процесс фиксации необходимо придерживаться определенных правил:
1. Размер исследуемых кусочков должен быть таким, чтобы про-изошло полное его пропитывание в оптимальные для данного фиксатора сроки. Решающее значение при этом имеет диффузионная способность фиксирующих жидкостей, которая у разных фиксаторов далеко не одинакова. Например, низкой диффузионной способностью обладают осмий, пикриновая кислота, платина, высокой – формалин, трихлоруксусная и уксусная кислоты, метиловый спирт и др. При фиксации ткани печени 1% осмиевой кислотой в течение 4 часов последняя проникает на глубину лишь 0,5-1 мм, в то время как кон-центрированный формалин за это же время успевает проникнуть на 4-5 мм. Следовательно, для фиксации осмием надо брать более тонкие кусочки (3-5 мм), чем для обработки формалином (10-15 мм). В среднем же для большинства фиксаторов берут кусочки толщиной 5-10 мм.
1. Размер исследуемых кусочков должен быть таким, чтобы про-изошло полное его пропитывание в оптимальные для данного фиксатора сроки. Решающее значение при этом имеет диффузионная способность фиксирующих жидкостей, которая у разных фиксаторов далеко не одинакова. Например, низкой диффузионной способностью обладают осмий, пикриновая кислота, платина, высокой – формалин, трихлоруксусная и уксусная кислоты, метиловый спирт и др. При фиксации ткани печени 1% осмиевой кислотой в течение 4 часов последняя проникает на глубину лишь 0,5-1 мм, в то время как кон-центрированный формалин за это же время успевает проникнуть на 4-5 мм. Следовательно, для фиксации осмием надо брать более тонкие кусочки (3-5 мм), чем для обработки формалином (10-15 мм). В среднем же для большинства фиксаторов берут кусочки толщиной 5-10 мм.