Длительное хранение спермы
Различают два вида анабиоза – естественный – путем создания повышенного осмотического давления, кислой реакции (рН –6,7-6,8) понижении температуры.
– искусственный – за счет резкого охлаждения.
– В 1902 г. Бахметьев – впервые научно обосновал теорию анабиоза.
– В 1907 г. Иванов применил низкие температуры близкие к 00
Существует два способа хранения спермы:
– при 0 – объем снижается в 10 раз но оплодотворяемость сохраняется не боле 3-4 дня.
– глубокое замораживание спермы (наиболее усовершенствованный метод)
-Преимущества-
а) – долго храня сперму, можно в течение года равномерно использовать быков-производителей, не допускать их перегрузки.
б) – используется индивидуальный подбор пар.
в) – сперма используется на 100 %, а в предыдущем только 50 %.
г) – проверка производителя по качеству потомства.
д) – создает возможность для крупномасштабной селекции.
е) – позволяет создать заносы спермы.
ё) – позволяет создавать новые породы, линии.
Ив. Васильевич Смирнов под руководством Милованова В.К. впервые заморозил сперму до – 79 0С выдерживал пакеты со спермой на поверхности твердой двуокиси углерода (сухого льда). Автор впервые получил потомство при использовании замороженной спермы кролика, барана, быка.
В 1948 г. группа биологов из Кембриджа (Англия) обнаружила криозащитные свойства глицерина.
В 1952 году для глубокого замораживания предложены О2 и N. Однако от использования кислорода отказались – т.к. он является активным окислителем. В практике нашей применяется жидкий азот.
В практике используют следующие виды расфасовки спермы:
– гранулы– облицованные
– не облицованные
– соломинки (пайеты)
Для глубокого замораживания в гранулах используют свежеполученную сперму, (быка) которая имеет активность не менее 8, концентрацию – 0,8 млрд. в мл.
Разбавляют синтетической средой:
Вода дистиллированная, мл. – 100
Лактоза или сахароза, г. – 11,5
Желток куриного яйца, мл. – 20
Глицерина, мл – 5,0
Спермосан, тыс. ЕД – 75
Среда подогрета до t –36 0С
Затем постепенно сперму эквилибрируют постепенно охлаждают 30 мин – до комнатной t -+ 18 0С , 4-5 часов до t -+ 5-0 0С. Это необходимо чтобы сперма адаптировалась к условиям внешней среды. Замораживание идет двух моментно. Сначала используют Г-Ц-Ж, а через 3 часа в процессе эквилибрации подслаиваем тотже Г-Ц-Ж + глицерин. После эквилибрации (уровновешивания) проверяют активность спермиев (не ниже 7 баллов).
Для замораживания в гранулах применяют термоизоляционный сосуд из нержавеющей стали и фторопластовые пластины с лунками по 0,2 и 0,5 мл.

Облицованные гранулы – для этого используют тонкостенную полимерную трубку диаметром 3,8-4 мм.
Её стерилизуют УФО. Заполненную спермой трубку подводят к сварочному аппарату, нарезают, маркируют (объем 0,25-0,33 мл).

Наиболее перспективная технология замораживания и фасовки спермы разработана в 1975 году Л.Кассу (Франция), который предложил применять полипропиленовые соломинки (пайетты) емкостью по 0,2 –0,4 мл.
Синтетическая среда – Лецифос 271 двух фракций
I. Вначале берут фракцию I (состоянию из лецифос 271, 3 % глицерина, 10 % желтка) эквилибрируют.
II. Фракция II – лецифос – 271, 11% глицерина, 10 – желтка глубокая заморозка в жидком азоте при - 196 0С. После заморозки пайетты собирают в габлеты, а затем в канистры.
Замораживание спермы производителей других с.-х. животных
– Баранов. Разработал Лапирин (совместно с Логиновой, Кузнецовым) присвоено звание Героя Соц. Труда. Технология в основном та, что и для быков. Особенность: более высокое осмотическое давление. Состав разбавителя:
Н2О дист. –100, цитрат Nа –2, глюкоза – 6,0, желток– 20 мл, глицерин–9 мл.
Активность после размораживания – 5 баллов, оплодотворяемость невысокая.
– Жеребцов – в 1956 г. профессор Канкин и аспирантка Ильинская. В 1968 – США. Наиболее удачная технология разработана Платоновым. Сперму центрифугируют в течении 10 мин. – 1200 об/мин.
Состав разбавителя: Н2О дист. –100, Nа двууглекислый –8 мг, лактоза – 11г., натрий лимоннокислый­ – 89 мг, хелатон – 100 мг, желток– 1,6 мл, глицерин–3,5 мл, спермосан – 25 тыс. ЕД.
Эквилибрация идет 2 часа. Фасуют в пакеты из фальги по 25 мл. Замораживают в парах жидкого азота в течении 5-7 мин. Если морозят гранулы но объем их 0,2 мл (125-150 гранул) в пакет – 25 мл доза на осеменение.
– Хряков – замораживают, но глицерина добавляют на 7-8 % больше. Оплодотворяемость низкая.